Exosomen aus humanen Zelllinien
- Herstellung: Nach Erreichen der Konfluenz werden die Zellen mit ihrem entsprechenden Zellkulturmedium für 48 Stunden inkubiert. Der Überstand wird gesammelt und alle verbleibenden Zellen werden durch 3-minütige Zentrifugation bei 300 x g entfernt. Ein zusätzlicher Zentrifugationsschritt bei 3.000 x g für 20 Minuten mit 4 °C wird durchgeführt um restliche Zellüberstände zu entfernen. Die Exosomen werden durch Fällung gesammelt, vorsichtig unter Verwendung von PBS-Hepes-Puffer resuspendiert. Ein erneuter Fällungsschritt wird durchgeführt um ein möglichst reines Produkt zu generieren.
- Lagerung: Die Exosomen werden in PBS in 25 mM Hepes, pH=7,2, gelagert. Das Exosomen-Aliquot sollte unter -20 °C gelagert werden wobei bei Langzeitlagerung eine Temperatur von -80 °C empfohlen wird
- Anwendungen: Exosomen sind optimale Träger für verschiedene Biomarker wie Proteine, RNA und Lipide.
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